概要

ノックアウトマウス（Knock-out mouse：KO mouse）（fig.1）はCRISPR/Cas9によるゲノム編集（genome editing）により1つ以上の遺伝子を欠損させたマウスのことです。遺伝子の塩基配列は決定しているものの、その遺伝子産物の機能が不明な場合にその機能を推定するための重要なモデル動物です。全身の細胞で、標的遺伝子がノックアウトされます。
セツロテック社では、マウス系統と遺伝子情報を頂くことで、ノックアウト受精卵やマウスを作製・納品致します。
切断箇所を決めるガイドRNA（gRNA）を、ノックアウトしたい遺伝子に合わせて設計します。
セツロテック社技術のエレクトロポレーション法（GEEP法）を用いてgRNAとCas9タンパク質を受精卵に導入します。
それを代理母マウスに移植し、産まれてきた子（F0世代＝ファウンダー世代）のジェノタイピング（genotyping）を行い、ゲノム編集マウスを得ます。

塩基欠損マウス作製

ガイドRNA（gRNA）とCas9タンパク質によって、塩基欠損（fig.2）でフレームシフト突然変異を誘導し、標的遺伝子を破壊します。
最も低コストでノックアウトマウスを作る方法です。
　　　　　　　　　　　

商品名	価格（税抜）	納期
F0ゲノム編集受精卵サービス	￥420,000～	2週間～
F0塩基欠損マウスサービス	お問い合わせ	2ヶ月～（fig.3）

＊マウス作製では、作業工程毎のお支払い（マイルストーン制）とさせて頂いております。
＊徳島大学ならびに納品先研究機関において、当該遺伝子の遺伝子実験と動物実験実施の承認を得るための手続き、その他書類作製時間を除きます。

エクソン欠損マウス作製

2種類のガイドRNAを同時に用いて、狙ったエクソンの上流と下流の塩基を欠損させ、エクソンを丸ごと欠失させます。（fig.4）塩基欠損マウス作製と比較して、遺伝子の機能ドメインを確実に破壊できる利点があります。
その代わりに塩基欠損によるノックアウトに比べ、難易度が上がります。セツロテック社では、確実にエクソンを欠損させるために予備実験として、gRNAの切断効率の評価などをin vitroで行い、その後に本試験を開始させていただきます。 　　　　　　　　　　　

商品名	価格（税抜）	納期
F0ゲノム編集受精卵サービス	￥570,000～	4週間～
エクソン欠損マウスサービス	お問い合わせ	3ヶ月～（fig.5）

＊マウス作製では、作業工程毎のお支払い（マイルストーン制）とさせて頂いております。
＊徳島大学ならびに納品先研究機関において、当該遺伝子の遺伝子実験と動物実験実施の承認を得るための手続き、その他書類作製時間を除きます。

Floxマウス作製

狙ったエクソンの上流と下流にloxP配列を挿入し、Creドライバーマウスと掛け合わせることで組織特異的な遺伝子破壊を誘導します。（fig.6）
セツロテック社では、コンディショナルノックアウトマウス作製に必要な、Floxマウスの作製を行います。
数世代のマウスを利用するため、納期は11ヶ月以上となります。 　　　　　　　　　　　

商品名	価格（税抜）	納期
Floxマウス作製サービス	お問い合わせ	11ヶ月～（fig.7）

＊マウス作製では、作業工程毎のお支払い（マイルストーン制）とさせて頂いております。
＊徳島大学ならびに納品先研究機関において、当該遺伝子の遺伝子実験と動物実験実施の承認を得るための手続き、その他書類作製時間を除きます。

オプション

＊価格はすべて　税抜価格　です。

• ゲノム編集受精卵オプション
  　　　　　　　　　　　

  オプション名	詳細
  受精卵追加 価格：￥66,000/25個	受精卵作製サービスで、25個単位で納品する受精卵を追加できます。 頭数を確保したいときにお使いください。
  遺伝子配列解析 価格：￥6,000/検体	作製されましたマウスの尾部サンプルより、SEQ解析でのジェノタイピングを行います。 サンガー法によるダイレクトシークエンスを行うため、波形が見えにくい、モザイクかどうかの判断がつかないなどの場合がございます。

• ゲノム編集マウスオプション
  　　　　　　　　　　　

  オプション名	詳細
  マウス繁殖（自然繁殖） 価格：￥220,000～/1世代	ゲノム編集マウスを、追加で飼育・繁殖するサービスです。メス2匹単位での交配となり、産仔マウスの遺伝子配列解析も行います。体外受精による繁殖、受精卵納品の場合は別途費用が発生致します。 標準サービスではF0世代のマウスの納品になりますが、F1世代での納品もしくは頭数を確保したい場合にご依頼ください。
  NGS解析 価格：￥165,000/系統	ゲノム編集マウスの配列決定時にサンガー法によるダイレクトシークエンスの代わりにNGS解析を行います。 モザイク個体など、ダイレクトシークエンスでの配列解析が難しい場合でも、しっかりとした配列決定が可能です。
  凍結精子/胚作製 価格：￥110,000（凍結胚）￥55,000（凍結精子）	ゲノム編集マウスを対象に、オスマウスからの凍結精子の作製、あるいは野生型マウスとの体外受精卵の凍結胚の作製を行い、納品します。特殊系統の場合は、ご相談ください。
  特殊系統対応サービス 価格：お問い合わせ	B6などの近交系以外のマウス系統や、ユーザー様の保有するマウスに対して、ゲノム編集を行うユーザー様はお申込みください。系統によりゲノム編集の条件検討が必要となります。
  マウス追加オプション 価格：￥6,000～/匹	2匹を超える目的ゲノム編集マウスが作製できた場合、追加で納品致します。点変異作製の際に作出された塩基欠損マウスや、ゲノム編集の切断パターンごとの個体差を確認したり、頭数を確保する場合にご注文ください。なお、目的ゲノム編集の有無の確認のみ行います（詳細解析結果は別料金）。 また、別途輸送費が発生する場合があります。

• その他マウスサービス
  　　　　　　　　　　　

  オプション名	詳細
  凍結精子 / 胚保管 価格：￥44,000/年/系統	ユーザー様より凍結精子、凍結胚をお預かりし、セツロテック社にて1年間凍結保存状態にて保管をします。（保管サービス、1年毎に更新手続きが必要です。）
  凍結精子 / 胚作製 価格：￥231,000（凍結胚）￥110,000（凍結精子）	ユーザー様よりオスマウスを搬入し、凍結精子の作製、あるいは野生型B6メスマウスとの体外受精卵の凍結胚の作製を行い、納品します。特殊系統の場合は、ご相談ください。
  個体復元（胚） 価格：￥275,000 個体復元（精子） 価格：￥385,000	ユーザー様よりご提供の凍結胚、あるいは凍結精子を用いた体外受精卵をレシピエントマウス3匹に移植を行います。アイソラックにて飼育を行い、産仔マウスを最大8週齢まで飼育します。ジェノタイピングが必要な場合は、別途費用を頂きます。特殊系統の場合は、ご相談ください。
  コンサルティング 価格：お問い合わせ	gRNAの設計のみ、2遺伝子同時ゲノム編集マウスの作製、制限酵素サイトを追加、偽遺伝子との判別など、お気軽にご相談ください。