マクロジェン・ジャパン / コスモ・バイオ ID: J00564

CRISPR-Cas9 ノックアウト・ノックインマウス作製受託サービス ID: J00564

サービスについて

背景

本サービスは韓国に拠点を置くMacrogen社により提供されます。Macrogen社はソウル大学・トランスジェニック研究所から受け継いだトランスジェニックおよびノックアウト動物作製技術を保有しており、1,000系統以上の樹立実績を有しています。Macrogen社の遺伝子改変マウス作製技術とBroad Instituteからライセンスを得た CRISPR-Cas9技術を組み合わせ、ご希望の遺伝子ノックアウト / ノックインマウスを短期間でリーズナブルにご提供いたします。

サービス内容(fig.1

サービス内容
1.  特定遺伝子のオフターゲットを考慮した3~5種類のsgRNA デザイン。 
2.  特定遺伝子用のCas9およびsgRNA合成。 
3.  合成されたCas9およびsgRNAのIn vitroバリデーションによる活性検証の実施。 
4.  In vitroバリデーションにより高い活性が確認された1~2種類のsgRNAおよびCas9タンパク質をSPFマウス(C57BL/6N strain)の受精卵前核(約200個使用)にマイクロインジェクションを行う。 受精卵前核にマイクロインジェクション
5.  マイクロインジェクションされた胚を仮親マウス(10~14匹)に移植。 
6.  ファウンダーマウス(F0)を最大40匹確保。 マウス
7.  SPF gradeマウス飼育施設でマウスを飼育。 マウスを飼育
8.  ファウンダーマウス (F0) から抽出したゲノム DNAを用いてT7E1アッセイとキャピラリーシーケンス(ABI3730使用)によるジェノタイピング解析 
9.  ゲノム編集の成功が確認できたF0ファウンダーマウス1~3匹をC57BL/6と交配してF1マウスを作製します。産子全頭についてPCRによるジェノタイピング(PCR で判別できない場合はT7E1 assay)を行い、選別されたF1マウス(4週令)を実験動物の専門委託運送業者を通じて納品(別途実費精算となります。) マウス

納品物

  • CRISPR/Cas9のデザイン結果レポート
  • CRISPR/Cas9の合成とIn vitro validation結果レポート
  • F0およびF1マウスのジェノタイピング結果レポート
  • ご希望のF1マウス

ご注文に関して

お問い合わせフォーム よりお問い合わせください。

参考価格・納期

コンベンショナルノックアウトマウス
サービス内容 標準納期 価格(税抜)
Cas9+sgRNAデザイン・合成および
In vitroバリデーション
4ヶ月 ¥1,250,000
マイクロインジェクション
ファウンダーマウス(F0)作製
F1マウス作製・納品 3ヶ月
コンディショナルノックアウト・ノックインマウス
サービス内容 標準納期 2回目以降
価格(税抜)
Cas9+sgRNA+ドナーベクター デザイン・合成 および
In vitroバリデーション
4~8ヶ月 ¥3,000,000
マイクロインジェクション
ファウンダーマウス(F0)作製
F1マウス作製・納品 3ヶ月

* F1 マウスが得られなかった場合や飼育中に死亡した場合でも、ノックアウトマウスの場合 96 万円、コンディショナルノックアウト・ノックインマウスの場合は 156 万円を作業費として申し受けます。
* 納期は標準納期になりますので、状況により納期が延期となる可能性もございますのでご承知おきください。
* 基本はマウス納品となりますが、凍結卵納品も承っております。また、マウスはマクロジェン本社(韓国)からの空輸となり、輸送時の規制(検疫)などの理由により、凍結卵の納品に変更となる場合がございます。

マイクロインジェクションサービス
お客様からご送付いただいたCas9、gRNA、ドナーベクター等を受精卵にマイクロインジェクションします。
得られたF0ファウンダーマウスの送料は別途ご請求となります。

項目 価格(税抜) 標準納期
受精卵50個使用 ¥240,000 3~4ヶ月
受精卵100個使用 ¥400,000
受精卵200個使用 ¥790,000
Genotyping(PCR) ¥223,000
Genotyping(cKO、KI/PCR) ¥260,000

オプションサービス

サービス名 サービス内容 価格(税抜)
凍結胚作製 ご提供頂いた雄マウス3匹から精子を採取し、野生型C57BL/6N雌マウス10~30匹から採取した卵子と体外受精し、凍結胚を200個作製します。凍結胚はガラス化法により凍結し、液体窒素で保管します。作製した凍結胚の一部は、融解後の生存率、体外培養での発生率を確認いたします。 ¥260,000
凍結胚輸送 ドライシッパー(World Courrier)にて、指定施設まで輸送します。 ¥317,000
ドライアイス梱包で(FedEx)指定施設まで輸送します。 ¥47,000

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