概要

動物細胞は生体と異なり、毒性物質に対して敏感に反応することが多いため毒性評価として用いられます。
医薬品化合物や化粧品、機能性食品素材、新規化合物といった添加物が及ぼす影響を、動物細胞を用いることで細胞毒性を示さない濃度や接触時間などの使用条件を見出します。
ここで得られた情報を基に様々な機能解析をおこないますので、まずは細胞を使った毒性評価をオススメします。

特長

• インキュベーターメーカーが手掛ける評価試験
• 死・生細胞数計数や生存細胞標識試薬などあらゆる手段で評価
• 細胞への影響の様子をタイムラプス撮影することが可能
• 使用細胞・実験方法の検討から結果解釈や動画作成まで幅広くサポート　どのように評価すれば良いかわからない場合でもご安心ください！
• 健康食品・サプリメント・乳酸菌生産物（バイオジェニックス）を用いた評価実績がございます。

実施例

• 発色試薬を用いたスクリーニング
  生存細胞と反応し発色する試薬を用い、複数種類・濃度での毒性評価をおこないます。（fig.1）
  
  
  fig.1 発色試薬を用いたスクリーニング

  使用細胞：HL60（ヒト白血病由来細胞株・浮遊系細胞） 測定手法：評価物質を添加後、48時間後に発色試薬を加え吸光度測定 評価方法：添加なしでの吸光度を1とした場合の吸光度の割合 ・添加物濃度2[nM]では細胞毒性はないと思われる ・添加物濃度20[nM]では強い細胞毒性があると思われる ・添加物濃度200[nM]では極めて強い毒性があると思われる （統計解析：「添加なし」とのt検定。*：p<0.05　**：p<0.01）



• タイムラプス撮影との組合せ
  生存細胞と反応し発色する試薬を用いた毒性評価にタイムラプス撮影を一緒におこないます。
  
  
  fig.2 添加なしでの吸光度を1とした場合の吸光度の割合

  
  fig.3 タイムラプス撮影：24時間後

  
  fig.4 タイムラプス撮影：36時間後
  
  fig.5 タイムラプス撮影：48時間後

  使用細胞：L929（マウス結合組織由来細胞株・接着系細胞）（fig.2） 測定手法：評価物質を添加後、24時間後に発色試薬を加え吸光度測定 評価方法：添加なしでの吸光度を1とした場合の吸光度の割合 ・添加物濃度0.5[uM]では弱い細胞毒性があると思われる ・添加物濃度5.0[nM]では強い細胞毒性があると思われる （統計解析：「添加なし」とのt検定。*：p<0.05）

  上記と同じ条件でタイムラプス撮影：24時間後（fig.3） ＊ 左から添加なし、0.5[nM]、5.0[nM]の順番 ・濃度0.5[uM]では細胞数が添加なしよりも少ない ・濃度5.0[nM]では細胞数がさらに少なくなっている

  上記と同じ条件でタイムラプス撮影：36時間後（fig.4） ＊ 左から添加なし、0.5[nM]、5.0[nM]の順番 ・濃度0.5[uM]では細胞数が添加なしよりも少ない ・濃度5.0[nM]では細胞死が確認される（赤矢印）

  上記と同じ条件でタイムラプス撮影：48時間後（fig.5） ＊ 左から添加なし、0.5[nM]、5.0[nM]の順番 ・濃度0.5[uM]では細胞数が添加なしよりも少ない ・濃度5.0[nM]では多数の細胞死が確認される（赤矢印）

  添加物濃度5.0[nM]では細胞増殖の抑制に加えて細胞死が発生するため、使用時の濃度に注意が必要となる
  添加時からのタイムラプス動画は下記の「毒性評価デモ動画」をご参照ください

---

納品物

・作業報告書（電子データ・印刷物）
・タイムラプス撮影をおこなった場合はそのデータ
＊ そのほか要望に合わせて納品物をご用意いたします。ご相談ください。