蛍光標識したMHCテトラマーを用いたフローサイトメトリーにより、サンプル中の抗原特異的T細胞を検出します。
| 前培養（IVS） | テトラマー解析前に、IVS（in vitro sensitization）による前培養を2週間行います。IVSは試験管内での抗原刺激によって抗原特異的T細胞の活性化や増殖を促す方法です。がん抗原特異的T細胞など、存在頻度の低い細胞を検出する場合に実施を推奨しています。（前培養なしでのご依頼も可能です。） |
|---|---|
| カスタムテトラマー作製（オプション） | ご提供いただいた抗原ペプチドを用いて、解析に使用する蛍光標識MHCテトラマーを作製します。（QuickSwitch Quant Tetramer Kitを使用） ＊ 対象：HLA-A*02:01およびHLA-A*24:02 ＊ ペプチドのHLAに対する結合親和性が低い場合、MHCテトラマーを作製できないことがあります。 |
| テトラマー染色 | 蛍光標識したMHCテトラマーとＴ細胞表面に発現しているT細胞受容体が結合します。 |
| フローサイトメトリーによる検出 | フローサイトメトリーにより、蛍光標識MHCテトラマーに結合した抗原特異的T細胞を直接検出します。 |
| データ解析 | 抗原特異的T細胞（MHCテトラマー陽性細胞）の存在率を算出します。 |
| MHCテトラマー解析 | PBMCの前培養後、MHCテトラマーを用いてテトラマー解析を行います。 ＊ 使用するMHCテトラマーは、ご提供いただくか、オプションの「カスタムテトラマー作製」を合わせてご依頼ください。 ＊ 前培養が不要な場合はご相談ください。 |
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|---|---|---|
| オプション | カスタムテトラマー作製 | 抗原ペプチドをご提供いただき、解析に使用する蛍光標識MHCテトラマーをカスタムで作製します。（対象：HLA-A*02:01およびHLA-A*24:02） |
| 抗原特異的T細胞の分離・回収 （セルソーティング） |
MHCテトラマーにより標識したオプションMHC陽性細胞をセルソーターを用いて分離・回収します。別途「T細胞受容体（TCR）レパトア解析」を組み合わせてご依頼いただくことも可能です。 | |
| 解析項目 | 材料 | 必要量 | 保存容器 | 保存方法 | 備考 |
|---|---|---|---|---|---|
| MHCテトラマー解析 | ヒトPBMC | 6×106 cells程度 （抗原ペプチド1種類あたり） 解析条件に依存するため要相談 |
1.5～2 mLチューブ | 細胞保存液を添加し、-80℃ | |
| 抗原ペプチド | 粉末 2 mg （凍結乾燥、純度95%以上） |
0.5～2 mLチューブ | 各ペプチドの最適保存条件にて保存 | 抗原ペプチドによる前培養を行う場合。詳細は個別にご相談ください。 | |
| MHCテトラマー （既製品） |
25 μL | 0.5～2 mLチューブ（遮光） | 4℃（遮光） | オプション「カスタムテトラマー作製」をご依頼いただく場合は不要 | |
| カスタムテトラマー作製 | 抗原ペプチド | 粉末 1 mg （凍結乾燥、純度95%以上） |
0.5～2 mLチューブ | 各ペプチドの最適保存条件にて保存 | 対象：HLA-A*02:01 HLA-A*24:02 |
| 抗原特異的T細胞の 分離・回収 |
別途お問い合わせください。 | ||||
| サンプルの保存条件 | 輸送条件 |
|---|---|
| 冷蔵（4℃） | 保冷剤梱包・冷蔵便 |
| 冷凍（-20℃）、超冷凍（-80℃） | ドライアイス梱包・冷凍便 |
| MHCテトラマー解析 | ・ドットプロット ・各細胞集団の細胞数および全細胞集団に占める割合 |
|---|---|
| オプション： 抗原特異的T細胞の分離・回収 （セルソーティング） |
別途お問い合わせください。 |
納品方法：以下のいずれか
・メール添付（パスワード付きZIPファイル）
・CD-R等
・クラウド
| サービス項目 | 価格（税抜） | 納期 |
|---|---|---|
| MHCテトラマー解析 | お問い合わせ | お問い合わせ |
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※お問い合わせは完了しておりません。
