概要
アラニンスキャニング変異誘発法(以下、ショットガン変異誘発法)を用いて、標的タンパク質の1つ1つのアミノ酸をアラニン点変異させ、立体構造を保持して各変異体をヒト細胞でハイスループットに発現させることにより、モノクローナル抗体(MAb)のエピトープを正確に同定します。複雑なタンパク質や立体配座エピトープの場合でも、95%を超える成功を収めた高解像度エピトープマッピングです。1,000以上のエピトープマッピングの実績があります。
* 抗体医薬の開発に有用なオフターゲット(Off-target)などとの結合試験を行うメンブレンプロテオームアレイ受託サービスについては、「
Membrane Proteome Array受託サービス」をご覧下さい。
ショットガン変異誘発法エピトープマッピングの有用性
高解像度のエピトープマッピングにより、作用機序を明らかにすることによる主力候補物質の選択、および知的所有権の強化によってMAbのプロテクションが可能になります。
特長
- Integral Molecular社独自のショットガン変異導入技術は、単一アミノ酸単位(分解能)で立体配座エピトープを確実にマッピングできる唯一のハイスループット技術です。
- これまでに1,000以上のエピトープをマッピングし、95%を超える成功例があります。
- 150以上の特許および使用文献があります。
実施例
- GPCR、トランスポーター、およびウイルスエンベロープタンパク質上のエピトープ
- 立体配座エピトープ
- マルチサブユニットタンパク質上のエピトープ
- レセプターの状態依存性エピトープ
ワークフロー
ショットガン変異誘発法エピトープマッピングのワークフロー
- 標的タンパク質の1つ1つのアミノ酸にアラニン点変異の自動導入(アミノ酸が元々アラニンの場合はセリン点変異)
- ヒト細胞における各タンパク質変異体のネイティブ発現、立体配座エピトープのマッピング
- ハイスループット発現、抗体反応性、および機能検査
- エピトープの3D構造可視化
マッピング受託サービスの種類
抗体エピトープマッピングサービス
目的のタンパク質用にアラニン走査変異ライブラリーを作製し、フローサイトメトリーによりのお客様の抗体 / リガンドの結合をテストしてエピトープ残基を特定します。
サービスの例
迅速化ReadyMapエピトープマッピングサービス(オプション)
エピトープ同定をより迅速に行えるように、以下のタンパク質については、完全長の構築済み(検証済み)の既存ライブラリーがご利用いただけます。コスト削減および納期短縮が可能です。
ReadyMap Library構築済みのタンパク質
タンパク質のクラス |
標的タンパク質 |
概要 |
GPCR |
CXCR2 |
Chemokine receptor |
CXCR4 |
Chemokine receptor |
LGR5 |
Leucine-rich repeat-containing G-protein coupled receptor 5, stem cell marker |
膜1回貫通型タンパク質 |
CD38 |
ADP-ribosyl cyclase |
CD137 (TNFSR9) |
TNF superfamily receptor |
PD1 |
Immune checkpoint |
PD-L1 |
Immune checkpoint |
レセプターチロシンキナーゼ(RTK) |
HER2 (ErbB2) |
EGFR family |
HER3 (ErbB3) |
EGFR family |
ウイルスタンパク質 |
DENV prM/E Serotypes 1-4 |
Dengue virus envelope proteins |
EBOV GP |
Zaire ebolavirus envelope glycoprotein |
MARV GP |
Marburg virus envelope glycoprotein |
HBsAg |
Hepatitis B Virus surface antigen |
HCV E1E2 |
Hepatitis C virus envelope proteins |
RSV-F |
Respiratory syncytial virus fusion protein |
SARS-CoV-2 S1, S2 |
SARS-CoV-2 Spike protein, including RBD, NTD, S2 |
ZIKV prM/E |
Zika virus envelope proteins |
低分子結合部位のマッピングサービス(オプション)
機能アッセイを用いてライブラリー上で低分子のスクリーニングを実施し、結合または機能に重要なアミノ酸残基の特定を行います。
サービスの例