従来の小型化(scFv化など)で活性が落ちてしまった等の課題をお持ちの方はぜひ一度お試しください。
1. 設計 | 提供頂いた配列をもとに、Fv-clasp化させるための配列設計を行い、遺伝子を合成いたします。 ・Heavy chain ①約510bp ②約580bp (His tag + TEV配列) ・Light chain ①約500bp ②約570bp (His tag + TEV配列) |
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2. 検討試験 (大腸菌発現系) |
合成した発現ベクターを用いて、BL21(DE3)株へ形質転換させます。作成した形質転換体を用いた少量発現検討を行い、発現するコンストラクトの組み合わせを決定します。 | |
3. 生産 | 検討試験の結果を元に、選定したコンストラクト(H鎖、L鎖)の生産を行います。 | |
4. 精製 | 発現体から発現物を抽出し、可溶化させます(H鎖、L鎖)。 可溶させた各H鎖、L鎖を混合しリフォールディングを行います。(透析法) リフォールディングサンプルをゲルろ過カラムにより精製し、得られた精製物を濃縮します。 BCA assayによるタンパク濃度測定とSDS-PAGE解析を行います。 |
* その他、ハイブリドーマからの抗体遺伝子クローニングをご希望の方はこちらをご参照ください。
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サービス項目 | 工程 | 期間 | 価格(税抜) |
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1. 設計 | コンストラクト設計、遺伝子合成 | 2~3週間 | ¥300,000 |
2. 検討試験 | 発現検討試験 | 2週間 | ¥200,000 |
3. 生産 | 1L生産(H鎖、L鎖) | 1週間 | ¥200,000 |
4. 精製 | 可溶化、リフォールディング | 2週間 | ¥1,800,000 | ゲルろ過 | 2週間 |
サンプルの濃縮・透析 | 2週間 | ||
【オプション】タグ切断 | His tagの切断(TEV proteaseによる) | 1週間 | ¥620,000 |
イオン交換精製 | 2週間 |
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