タカラバイオ / タカラバイオ ID: J02108

空間トランスクリプトーム解析(全トランスクリプトーム空間解析) ID: J02108

サービスについて

特長

  • 凍結組織からの高感度空間トランスクリプトーム解析
  • Broad Instituteで開発されたSlide-seq v2(Curio Seeker)(*1)がベース技術
  • シングルセルレベルの解像度で解析可能
  • polyAを持つ全トランスクリプトームが解析対象
  • 様々な真核生物で解析可能
*1 原理の詳細は使用文献・参考文献をご参照ください。

概要

組織中の形態学的位置情報を保持したまま遺伝子発現解析が可能なCurio Seeker Spatial Transcriptomics Kit(Curio Seekerキット)を用いて空間トランスクリプトーム解析を行います。polyAを持つmRNAを解析対象とするため、様々な真核生物における全トランスクリプトームが解析可能です。このアッセイは次世代シーケンサー以外の特別な装置を必要としないため、Curio Seekerキットを購入いただき、お客様ご自身で作製いただいた切片スライドグラスやライブラリーを送付いただくことで、途中工程から依頼いただくことも可能です。

サービス内容

凍結組織などを提供いただき、位置情報バーコードおよびmRNAキャプチャー配列を持つビーズ(直径10μm)が敷き詰められたTile Slide上に、凍結組織切片を配置する事で、組織中のmRNAをビーズで捕捉し空間位置情報を含むcDNAライブラリーを調製します。イルミナ社シーケンサー(NovaSeq)でシーケンスし、得られたデータとビーズ位置情報を専用ソフトで解析することで、高感度な空間遺伝子発現マップを構築します。(fig.1)(fig.2)(fig.3
* Curio Seeker Spatial Transcriptomics Kitを事前にご購入いただきます。
* スライド作製等の一部作業は病理会社へ委託する可能性があります。
Curio Seekerバイオインフォマティクスパイプライン結果には、クラスタリング結果、UMAP(次元削減)結果、空間マップ(fig.1 A:マウス海馬、3 mm×3 mmタイル、B:マウス全脳、10 mm×10 mmタイル)等が含まれます。

納品物

  • 作業報告書
  • シーケンスデータ(fastq)
  • 解析データ(シングルセル解析結果+空間マップ結果等) 一式
クラウド納品について
Boxによるクラウド納品を行います。共同研究者様とのデータの共有を簡単に行っていただけます。

* クラウド納品ご選択時の注意事項
  • シーケンスデータはサイズが大きいためダウンロードに時間を要する場合がございます。
    事前に回線速度を測定し、ご確認の上、ご依頼ください。
    推奨回線速度計測サイトはこちらから
  • 回線速度が110 Mbpsの場合:500 GByteのダウンロードに10時間、50 Mbpsの場合:23時間が目安です。
  • シーケンスデータサイズの目安は以下となります。
    エクソームシーケンスやRNA-Seq
    (シーケンスデータ量 5~6 Gbase/サンプル)
    約5 GByte/サンプル
    全ゲノムシーケンス
    (シーケンスデータ量 90 Gbase/サンプル)
    約70 GByte/サンプル
  • 150 GByteを超える大量のデータをダウンロードする際にはBox Drive(デスクトップ用アプリ)をインストールしてご利用ください。
  • ご依頼内容によっては対応が難しい場合がございます。その場合は、メディア納品(HDD等)への変更をご案内します。
  • 事前のテストをご希望の場合はご連絡ください。

受入検体

  • 凍結組織の場合
    ✔ 凍結組織
    Curio Seeker Spatial Transcriptomics Kit 一式(Cat. No. SK004またはSK003)
    Curio Seeker Dual Indexing Primer Kit V2(Cat. No. K006)
    * 凍結組織の準備・送付方法や試薬購入については事前にご相談ください。
  • 凍結切片スライドグラスの場合:お客様にて切片の解析領域位置を決定できます。
    ✔ 凍結切片スライドグラス 1枚(Tile Slideに貼り付けたもの)
    ✔ 凍結切片スライドグラス 1枚(HE染色用)
    Curio Seeker Spatial Transcriptomics Kit 一式(Cat. No. SK004またはSK003)
    Curio Seeker Dual Indexing Primer Kit V2(Cat. No. K006)
    * 切片スライドグラスの準備・送付方法や試薬購入については事前にご相談ください。
  • Curio Seeker kitを用いて作製したライブラリー溶液の場合:シーケンス作業以降のみを実施いたします。
    ✔ ライブラリー溶液
    ✔ ライブラリー定量結果(QubitおよびBioanalyzerまたはTapeStation結果)
    Seeker 10x10 Bundle(Cat. No. SK003)またはSeeker 3x3 Bundle V1.1(Cat. No. SK004)のキット情報
    ✔ ビーズバーコードファイル
    * ライブラリーは作業マニュアルに従ってQubitおよびBioanalyzerまたはTapeStationによるDNA定量を行ってください。
    * ビーズバーコードファイルはCurio Seeker Spatial Transcriptomics KitのTile SlideのQRバーコードよりwebアクセスし、ダウンロード可能です。

ご注文に関して

お問い合わせフォーム よりお問い合わせください。

参考価格・納期

サービス項目 価格(税込) 納期
空間トランスクリプトーム解析(全トランスクリプトーム空間解析) お問い合わせ お問い合わせ

関連サイト