概要

こんな方にオススメ！

• ターゲット分子を定量するキットがない。
• 新しいアッセイ系を構築したいが、時間がない、人がいない。
• 化合物や抗体の評価系が欲しい。

対応業務

• Biochemical assay
• Cell-based assay
• Target-based assay
• 各種PPI assay
• 各種Enzyme assay
• 各種ELISA

受託試験の流れと実施項目

1.ヒアリング	お客様の抱える問題を、専門性の高いスタッフがヒアリング。解決策を検討いたします。 細胞アッセイ、酵素アッセイ、PPIなど アッセイに使用するタンパク質や細胞の調達方法について 依頼内容について（活性確認、バリデーション、スクリーニング） こんな情報があると速やかに進みます お客様の施設で使用できる機器は何か どのようなアッセイ系をお望みか 酵素および細胞は購入可能か、作製済みか 予備実験実施の有無やデータなど ポジコン化合物や抗体はお持ちか ＊もちろん、これらの情報がなくても受託可能です。
2.アッセイ系の提案	お客様の提供された情報をもとに最適なアッセイ系を提案いたします。 TR-FRET、HTRF AlphaScreen、AlphaLISA NanoBiT、NanoBRET 各種、吸光・蛍光・発光アッセイ
3.活性確認	提案させていただいたアッセイ系に納得していただいた場合、試薬を調達して初期検討を実施いたします。 細胞作製、タンパク質精製、抗体作製、ペプチド合成 購入した試薬や材料の検討 活性確認（S/N比など）
4.バリデーション	初期検討にて活性が確認された場合、反応に係る試薬の最適化を実施いたします。 Buffer条件、酵素や基質の最適濃度の設定、ポジコン化合物などを用いてのアッセイを実施します S/N、S/B、Z’-factor、EC50、IC50、Kmなどを測定します ご希望の場合、プレート間差、ロット間差なども実施します
5.化合物スクリーニング	構築したアッセイ系をお客様の施設でも実施できるように技術トランスファーを行います。 テクノプロで小規模スクリーニグの実施も可能です。（要化合物提供）

こんなことも出来ます

Step1.ベクター構築（約3週間）	・Plasmid Vectorの構築 ・Maxi-prepでのplasmid調製 ・配列解析
Step2.タンパク質発現細胞の調整（約1ヶ月）	・Expi-CHOでのタンパク質発現 ・発現条件の検討 ・発現条件の検討 ・細胞の事前調整 ・本番発現（200mL）
Step3.アッセイ系構築（約2週間）	・蛍光基質酵素アッセイ ・Km値の算出 ・組換えタンパク質の活性確認 ・基質特異性の確認 ・ポジコン化合物の阻害活性測定 ・バリデーションなし
Step4.納品	・384plateで400枚分の酵素を獲得（お客様の依頼は数十枚分） ・構築した基本プロトコールをもとにバリデーションはお客様が実施する

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実績例

　　　　　

ご相談内容	工程	納期
キナーゼアッセイ系の構築	市販の酵素および測定試薬を用いて、バリデーションを実施した。（3アッセイ構築）	2ヶ月
AlphaScreen系の構築	基質に対する特異的抗体を用いて酵素アッセイを実施した。（1アッセイ構築）	1ヶ月
NanoBit系の構築	Lg-Bit、Sm-Bitをそれぞれ融合させた2種類のタンパクを合成するプラスミドの構築し、2つのプラスミドをダブルトランスフェクションすることによってNanoLucが機能するアッセイ系を構築。（プラスミド構築+活性確認）	2ヶ月
TR-FRETを使用した抗体評価	細胞発現系により得た抗体が機能するかについてTR-FRETを用いたアッセイにて評価した。（抗体発現+アッセイ系）	3ヶ月
NanoLucを用いたプロモーターアッセイ	プロモーター配列を挿入したプラスミドを細胞に導入して、NanoLucの発現量を測定するアッセイ系を構築。（プラスミド構築+活性確認）	3ヶ月

＊工数、期間、培養量等によって価格は変動いたします。