タカラバイオ / タカラバイオ ID: J00162

安定発現細胞株作製・哺乳動物細胞実験 ID: J00162

サービスについて

特長

  • お客様の細胞に目的遺伝子を恒常的に発現
  • 任意のプロモーターを挿入可能!発現ユニットのマルチ挿入による高発現株作製に
  • 哺乳動物細胞を用いた各種アッセイについてもサポート

概要

お客様から提供いただく任意の哺乳動物細胞(CHO、HEK293など)にDNAトランスフェクション法等により目的遺伝子を導入し、薬剤選択により遺伝子安定発現細胞株(stable clone)を取得します。目的遺伝子について、タグやシグナルの付加、レポータータンパク質との共発現など、実験に適したプラスミドの構築からご相談させていただきます。
その他、レトロウイルスベクターレンチウイルスベクターによる遺伝子導入を用いた遺伝子導入による安定発現細胞株作製も承ります。また、哺乳動物細胞を用いた各種実験など、お客様の研究目的に応じてご要望を承ります。(fig.1

サービス内容

作業は、相談のうえ、ご希望に沿った形で提案させていただきます。

  • DNAトランスフェクション法による遺伝子安定発現細胞株 (stable clone) の作製
    標準作業は(fig.2)のとおりです。
    ・遺伝子の一過性発現を確認してから安定発現細胞株作製に進むことができます。
    ・ウェスタンブロット解析やFCM解析での発現確認をご希望の場合には、一次抗体およびポジティブコントロールタンパク質 / 細胞を
     ご提供いただきます。
    レトロウイルスベクターレンチウイルスベクター感染による遺伝子導入も別途承ります。
  • 遺伝子増幅発現系(dhfr)での安定発現細胞株作製
    CHO/dhfr(-) 細胞において作製します。遺伝子増幅を行わない系に比べて、1オーダー以上高いタンパク質発現量が期待できます。タンパク質取得を目的とされる場合に、ご検討ください。
  • 哺乳動物細胞を用いた各種アッセイなど
    ・細胞の薬剤処理による目的遺伝子の発現検討
    ・細胞増殖アッセイ
    プロトコールの定まった細胞アッセイ代行も承ります。お気軽にご相談ください。

[オプションサービス]

  • プラスミドDNA調製
  • 安定発現細胞株の大量培養
  • DNAトランスフェクションによる一過性タンパク質発現培養

納品物

  • 作業報告書
  • DNAトランスフェクション法による安定発現細胞株作製受託の場合は、標準として安定発現細胞株5クローンの凍結細胞
  • ウイルスベクター法による安定発現細胞株作製受託の場合は、薬剤耐性Pool細胞株の凍結細胞

受入サンプル

  • 標的細胞株、培地類
  • 薬剤耐性遺伝子搭載の目的遺伝子発現プラスミドDNA など

ご注文に関して

お問い合わせフォーム よりお問い合わせください。

参考価格・納期

サービス項目 参考価格(税抜) 参考納期
遺伝子安定発現細胞株の作製
DNAトランスフェクション法(*1) ¥3,750,000~  1件あたり 約4ヶ月
レトロウイルスベクター法(*2) ¥3,100,000~  1件あたり 約2.5~3ヶ月
レンチウイルスベクター法(*2) ¥3,100,000~  1件あたり 約2.5~3ヶ月
(プラスミドDNA構築・調製) 別途ご相談
(薬剤耐性濃度検討) 別途ご相談
(シングルセルクローニング検討) 別途ご相談
(遺伝子導入条件検討) 別途ご相談
(クローニング・ストック調製) 別途ご相談
(FCM解析) 別途ご相談
(哺乳動物細胞を用いた各種アッセイなど) 別途ご相談

*1 基本価格に含まれる作業:
細胞セットアップ(受入試験)、予備検討、本導入(プール細胞作製)、一過性発現確認(リアルタイムPCR)、クローニング(~30クローン)、一時ストック調製、リアルタイムPCRでの発現確認(簡易)、納品クローン調製(最大5クローン)
*2 基本価格に含まれる作業:
細胞セットアップ(受入試験)、予備検討、ウイルスベクターの作製、薬剤選択による安定株作製(Pool)、Pool細胞の発現確認(リアルタイムPCR)
* 価格・納期は手法や細胞によって異なりますので、別途ご相談ください。

関連サイト