CRISPR/Cas9システムによるゲノム編集のオールインワンベクターを構築します。

サービスについて

概要

お客様のターゲットに対するgRNAデザインからベクター構築、プラスミド調製のほか、オプションで培養細胞を用いた活性評価サービスを提供します。

サービス内容

  • GeneArt® CRISPR Nuclease Vector
    CRISPR/Cas9システムによるゲノム編集のオールインワンベクターです。標的配列に相補的なgRNAを設計し、ベクターへクローニングして細胞へ導入して使用します。このベクターにはレポーター遺伝子のCD4遺伝子かOrange Fluorescent Protein(OFP)遺伝子が含まれています。これらの細胞での発現を目印に、トランスフェクション効率の確認や、抗CD4抗体が結合した磁気ビーズやセルソーターでCRISPR/Cas9を発現した細胞を濃縮し、目的細胞をスピーディにクローニングできます。
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  • GeneArt® Genomic Cleavage Detection Kit
    ゲノム編集の標的箇所付近のDNAをPCRで増幅し、再度アニールすると、塩基の挿入 / 欠失が起こった箇所ではヘテロ二本鎖ミスマッチが形成されます。このミスマッチを特異的に認識して切断する特別な酵素で処理し、その断片をゲル電気泳動して確認します。GeneArt® Genomic Cleavage Detection Kitは、ゲノムDNAやPCR産物の精製を省くことで、標的遺伝子の変異が簡単に検出できる特長をもったキットです。
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基本作業・期間

配列デザイン / オリゴDNA合成 ご提供いただいた配列情報を用いて最適なターゲット配列をデザインし、オリゴDNAを合成します。 3週間
オリゴアニーリング / CRISPR Nuclease Vectorへの挿入 オリゴをアニーリングして二本鎖を形成させ、ご希望のCRISPR Nuclease Vectorにライゲーション反応で挿入します。
大腸菌の形質転換 / ミニプレップ 反応液で大腸菌を形質転換し、得られたコロニーからプラスミドをミニプレップにより抽出します(トランスフェクショングレード)。
インサート配列確認 シーケンス解析により目的配列が挿入されたことを確認します。

ご提供いただくもの

以下の情報を必須内容として、専用のフォームにご記入の上ご提供いただきます。

  • 標的遺伝子名(必須)
  • アクセッションナンバー(必須)
  • 対象生物種名(学名)(必須)
  • 標的遺伝子の標的ゲノムDNA配列(必須、取得マニュアル)
  • CRISPR Nucleaseベクターの種類(必須)
  • CRISPR gRNAデザイン本数(必須)
  • ご利用目的(必須) * ノックインまたはノックアウト、そのほか、からご選択いただきます。

ご注文に関して

お問い合わせフォーム よりお問い合わせください。

参考価格・納期

サービス項目 価格(税抜) 納期
GeneArt CRISPR Nuclease Vector構築 1コンストラクト ¥75,000 / vector(計 ¥75,000) お問い合わせ
2コンストラクト ¥70,000 / vector (計 ¥140,000)
3コンストラクト ¥49,500 / vector (計 ¥148,500)
【オプション】プラスミド精製 ¥30,000~ / vector(50μg~) 2週間~
【オプション】活性評価サービス ¥220,000 (3コンストラクトまで) 3週間

関連サイト