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サーモフィッシャーサイエンティフィック / サーモフィッシャーサイエンティフィック ID: J00829

TOPOクローニングサービス ID: J00829

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従来のクローニングに比べ、より迅速で高効率に組換え体を生産

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サービスについて

概要

従来のクローニングに比べ、より迅速で高効率に組換え体を生産できます。（fig.1）

fig.1 TOPOクローニングの原理

特長

  • 発現ベクターにも直接クローニングが可能。
  • InvitrogenTM GatewayTM クローニングシステムのエントリークローン作製も可能です。
  • ゲノムまたはライブラリーの配列解析にも適しています。
  • TOPO® クローニングの原理（fig.1）
    　・平滑末端DNAのZero Blunt® TOPO® クローニング
    　・平滑末端DNA方向性TOPO® クローニング

基本作業・期間

1. 目的遺伝子の増幅 プライマー設計及び合成 ご指定いただいた配列のプライマーを合成し、PCR反応を実施します。目的遺伝子に方向性を持たせる場合は、5’側のプライマーにCACCの配列を付加します。 1週間
PCR
2. クローニング 増幅産物の精製 PCR産物の精製後、ご指定いただいたTOPOベクターへクローニングします。 2週間
TOPO反応
大腸菌形質転換 PCRまたは制限酵素処理により、得られたクローンのインサートの長さを確認します。
インサートチェック
組換え部位の配列確認 ベクター側からインサートの方向へ1反応ずつ（両末端）の配列解析を行い、クローニングの成否を確認します。
3. 配列解析 インサート全長配列解析 目的の遺伝子配列と完全に一致しているかを確認します。 2週間

  • Gatewayシステム対応のInvitrogenTM TOPOTM もございます
  • InvitrogenTM TA CloningTM をご希望のお客様はお問い合わせ下さい

ご提供いただくもの

  • PCR増幅用テンプレート（polyA（+）RNA、total RNA、cDNA、cDNAライブラリー、プラスミドDNA、ゲノムDNA）、polyA（+）RNA 、total RNAは逆転写反応し（別料金）、得られたcDNAをテンプレートとして用います。
  • 目的遺伝子の配列情報、またはデータベース Accession No.

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参考価格・納期

サービス項目 価格（税抜） 納期
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  • ※価格及び、サービスの仕様・内容などにつきまして、予告なしに変更されることがあります。
  • ※表示している参考価格は消費税等は含まれておりません。
  • ※受託サービスは、すべて研究目的として作業を行います。その他の目的（医療品・食品の製造・品質管理や医療診断など）には使用しないで下さい。
  • ※納期は参考納期です。諸事情により、前後する場合がございます。納期の詳細については個別にお問い合わせください。
  • ※会社名・サービス名などは、各社の商標・登録商標です。
  • ※納品物によっては、その構成物（例えば、ベクター、蛍光色素など）の使用に制限がある場合があります。
  • ※ヒト臨床サンプルの場合はインフォームドコンセントを得ていることをご確認ください。 ヒト由来のサンプルの場合、ご所属の組織の倫理委員会などで承認が得られたものが受領されます。
  • ※人間への感染性が疑われるサンプルに関しては、お受けできない可能性がございます。
  • ※サンプルの保管および返却を行っていない場合があります。お客様より提供いただいたサンプルおよび解析データ等は、業務終了後、廃棄される場合がございます。

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