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フィルジェン / フィルジェン ID: J00634

Simple Western 受託解析サービス ID: J00634

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従来のウェスタンブロットよりもばらつきが小さく、高い再現性を実現

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サービスについて

概要

ProteinSimple社の全自動キャピラリー電気泳動イムノアッセイシステム「Wes system（fig.1）」を使用した受託解析サービスをご提供しています。ProteinSimple社製 Wesでは、タンパク質分離を分子量のみで行うSimple WesternTM サイズベースアッセイを用いて、サンプルのロード、サイズベースのタンパク質分離、免疫反応、洗浄、検出、データ解析の全ての工程が自動化されています。
Simple WesternTM サイズベースアッセイは、広く使われている分離技術であるキャピラリー電気泳動と、イムノアッセイを組み合わせたもので、ばらつきが小さく、高い再現性が実現されています。

fig.1 Wes system

特長

  • ウェスタンブロットのプロトコールで使用していたのと同じ抗体をSimple WesternTM に利用できます。
  • 専用設計されたキャピラリーカートリッジを用いて、最大24サンプルを同時測定することができます。（ラダー使用分を除く）
  • 12～230kDa、または、66～440kDaの大きさのタンパク質を分離し、解析することができます。
  • 専用のCompassソフトウェアで自動的に再現性高く解析されます。
  • 従来のウェスタンブロットよりもばらつきが小さく、再現性が高い。（測定内CV＜15%、Hela細胞ライセートを用いたERK1検出時）

サービス内容

  • ゲル画像例（fig.2）
  • Simple WesternTM サイズベースアッセイの原理（fig.3）
    Simple WesternTM 受託解析サービスで使用するProteinSimple社製Wesは、ゲルの準備（カートリッジ）・サンプルのロード・分離モニター・ブロッティング・ブロッキング・インキュベーション・洗浄・シグナル検出・データ解析をすべて自動的に行います。
    タンパク質がキャピラリー内で分離された後に、光化学反応によりキャピラリー内壁にタンパク質がトラップ（固相化）されます。
    ゲルマトリックスを洗い流した後、一次抗体および二次抗体の免疫反応を行い、化学発光反応でタンパク質が特異的に検出されます。この化学発光シグナルを画像として検出し、解析します。

fig.2 ゲル画像例

fig.3 Simple WesternTM サイズベースアッセイの原理
  • 解析の流れ
    1. 解析サンプル・一次抗体・二次抗体の送付
      解析サンプル・一次抗体・二次抗体とQCシートを併せてフィルジェンへご送付ください。
      送付された内容物とQCシートの内容が一致するかを受け入れ確認します。
    2. 測定サンプルの調整
      キット添付のSample buffer（SDS, DTT含有）を用いて、0.2mg/mL程度に調整を行います。
    3. 一次抗体及び二次抗体の調整
      キット添付のAntibody Diluent Ⅱを用いて抗体の調整を行います。
      二次抗体は、キット添付の二次抗体をProtocolに準じて使用します。
      Simple Western Antibody Databaseよりご選択頂いた一次抗体または二次抗体は、Database記載の希釈倍率に準じます。
    4. 測定及び解析
      ProteinSimple社製Wes及び、Master Kitを用いて測定を行います。専用のCompassソフトウェアで自動的に解析を行います。免疫検出されたそれぞれのタンパク質について、擬似的なゲル画像、分子量、シグナル強度（面積）、S/N比など多くの情報が得られます。
    5. 解析データのご報告
      データ解析結果をCD-ROMに収録し、ご報告いたします。納期は、使用キット入荷及びサンプル・抗体到着後、20～25営業日程度です。

ご注文に関して

お問い合わせフォーム よりお問い合わせください。

参考価格・納期

サービス名 検出範囲
（*2）		 一次抗体
（*3）		 二次抗体 価格（税抜） Cat.#
Simple WesternTM 受託解析サービス（*6）

*1反応（25キャピラリー）の場合		 2～40kDa 「Simple Western Antibody
Database(*4)」より、
一次抗体を検索・選択の上、
ご準備ください。		 ラビット ￥450,000 F-SW1-R-1
マウス F-SW1-M-1
その他 F-SW1-O-1
12～230kDa ラビット F-SW2-R-1
マウス F-SW2-M-1
その他 F-SW2-O-1
66～440kDa ラビット F-SW3-R-1
マウス F-SW3-M-1
その他 F-SW3-O-1
2反応
*検出サイズ/二次抗体が同一の場合に限る		 ￥675,000 （各型番）-2
3反応
*検出サイズ/二次抗体が同一の場合に限る		 ￥900,000 （各型番）-3
4反応
*検出サイズ/二次抗体が同一の場合に限る		 ￥1,125,000 （各型番）-4
5反応
*検出サイズ/二次抗体が同一の場合に限る		 お問合せ （各型番）-5

＊1 ラダー（タンパク質分子量マーカー）の測定も行います。
＊2 検出範囲は、測定タンパク質の分子量を目安にした、おおよその検出可能範囲の目安です。測定タンパク質に応じた範囲をご選択ください。
＊3 測定1回にて、画像結果が1ファイルになります。複数種類の組み合わせにより、キャピラリー間でのバックグラウンドや検出感度の差などにより画像解析が困難になるが場合があります。複数種類の組み合わせ似て測定をご希望の場合、一次抗体の組み合わせ数に応じてご発注ください。
＊4 「Simple Western Antibody Database」のURLは、「http://www.proteinsimple.jp/antibody/antibodies.html」です。
＊5 生物種がラット、マウスの場合は、試薬キット添付の二次抗体を用います。生物種がその他の場合は「Simple Western Antibody Database（＊4）」より二次抗体を検索・選択の上、ご準備ください。
＊6 カートリッジ間のデータを比較する場合は、別途System Control料金（￥27,000（税抜））が必要となります。
＊ QCシートはフィルジェン社Webサイト「ダウンロード / 受託解析のQCシート」からダウンロードし、必要事項をご記入のうえ、サンプルと同送してください。 ＊ 本サービスは、研究目的での解析に限ります。ヒトへの感染症が疑われる試料の場合、受け入れをお断りいたしますので、予めご了承ください。
＊ タンパク質試料溶液含有物や抗体とのマッチングなどの要因により、すべての実験系において、目的分子が検出可能とは限らないことを予めご了承ください。
＊ 結果の如何に関わらず、作業料金をご請求させていただきます。

関連サイト

  • ※価格及び、サービスの仕様・内容などにつきまして、予告なしに変更されることがあります。
  • ※表示している参考価格は消費税等は含まれておりません。
  • ※受託サービスは、すべて研究目的として作業を行います。その他の目的（医療品・食品の製造・品質管理や医療診断など）には使用しないで下さい。
  • ※納期は参考納期です。諸事情により、前後する場合がございます。納期の詳細については個別にお問い合わせください。
  • ※会社名・サービス名などは、各社の商標・登録商標です。
  • ※納品物によっては、その構成物（例えば、ベクター、蛍光色素など）の使用に制限がある場合があります。
  • ※ヒト臨床サンプルの場合はインフォームドコンセントを得ていることをご確認ください。 ヒト由来のサンプルの場合、ご所属の組織の倫理委員会などで承認が得られたものが受領されます。
  • ※人間への感染性が疑われるサンプルに関しては、お受けできない可能性がございます。
  • ※サンプルの保管および返却を行っていない場合があります。お客様より提供いただいたサンプルおよび解析データ等は、業務終了後、廃棄される場合がございます。

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