概要
昆虫細胞・バキュロウイルスによるタンパク質発現受託サービスを提供しております。
バキュロウイルスの強力なプロモーターを利用して安価・大量にタンパクを生産いたします。発現コンストラクトの作製から生産・精製までトータルにサポートし、少量培養から大量培養まで一定条件でのスケールアップが可能です。
特長
- 高発現株であるexpresSF+を標準使用
- 糖鎖等の翻訳後修飾を受けたタンパク質が取得可能
- 日本国内で400件以上の実績（受託サービスとして300件以上）
- ベクター構築から生産・精製までトータルにサポート（各ステップのみの受託も承ります）
- お客様が希望の試験系・スケールアップに対応
［過去の生産事例］
＊ 2008年4月～2023年3月受託生産分
- 発現成功率（ウェスタンブロッティングによる発現確認）
| Protein Type |
Projects |
成功率（%） |
| 分泌型タンパク質 |
110/111 |
99.1 |
| 膜タンパク質 |
90/91 |
98.9 |
| 細胞内タンパク質 |
82/82 |
100 |
| 核タンパク質 |
50/53 |
94.3 |
| ウイルス由来タンパク質 |
80/80 |
100 |
| その他局在不明 |
19/19 |
100 |
| Total success rate: |
431/436 |
98.9 |
- 生産量と純度（fig.2）
サービス内容
［BAC Xpress EZ（簡易発現コース）］
昆虫細胞およびバキュロウイルスを用いた組み換えタンパク質の簡易的な発現受託サービスです。
組み換えタンパク質を最短2週間でお手元にお届けいたします。「低コストで発現チェックを行いたい方」にオススメのサービスです。
また、簡易的な1L生産・精製コースもご用意しておりますので、精製タンパク質が必要な方にもご利用いただけます。
- サービスの流れ
- 発現ベクターの作製（＊）
頂いたターゲット情報をもとに、発現ベクターを構築します。（お客様ご自身でベクター構築も可能です。）
- コトランスフェクション
発現ベクターとAcNPV genome DNAをsf9細胞に今トランスフェクションし、簡易的に組み換えウイスル液を作製します。
（一般的に行われるウイルスの純化・倍幅・タイター測定を省略しております）
- 生産・発現確認
100mLのexpresSF+® 細胞にウイルス液を添加後、組み換えタンパク質を発現させ、ウェスタンブロッティングにより発現を確認します。
簡易発現で精製を希望される方に1 Lの生産プランをご用意しております。
（100 mLで精製すると十分な量・質のタンパク質が得られないリスクがあるため）
- 試料・試験報告書 納品
発現物と報告書を送付いたします。
- 発現例（fig.3）
His-tag付きタンパク質の発現（ウェスタンブロッティング）
［BAC Xpress（通常コース）］
Bac Xpress EZでウイルス液作製後、ウイルスの純化から発現条件検討、大量生産まで提供する網羅的サービスです。
ステップごとに対応可能で、お客様のご希望に合わせた試験系を構築しいたします。
- サービスの流れ（ウイルス液作製後）
- ウイルスの純化
作製したウイルス液をプラークアッセイにより純化。純化したウイルスを増幅させ、生産用ウイルス液を作製する。
- タイター測定
作製したウイルス液のタイター（力価）を測定する。
- 発現条件検討
生産用ウイルス液を用いて、MOI：2 or 3 点、時間：3 点で条件検討を行い、最適な感染条件を決定する。
- 生産・発現確認
お客様ご指定のスケールのexpresSF+® 細胞培養液に生産用ウイルス液を添加し、組み換えタンパク質の生産を行う。
その後、発現物をウェスタンブロッティングで確認する。
- アフィニティー精製
お客様ご指定のプロトコルで精製を実施。
- 試料・試験報告書 納品
精製物（生産のみの場合、培養上清または細胞ペレット）、各ステップで作製したウイルス液、報告書を送付いたします。
