富士フイルム和光純薬 / 富士フイルム和光純薬 ID: J00237

昆虫細胞・バキュロウイルス発現系によるタンパク発現 ID: J00237

サービスについて

概要

昆虫細胞・バキュロウイルスによるタンパク質発現受託サービスを提供しております。
バキュロウイルスの強力なプロモーターを利用して安価・大量にタンパクを生産いたします。発現コンストラクトの作製から生産・精製までトータルにサポートし、少量培養から大量培養まで一定条件でのスケールアップが可能です。

特長

  • 高発現株であるexpresSF+を標準使用
  • 糖鎖等の翻訳後修飾を受けたタンパク質が取得可能
  • 日本国内で400件以上の実績(受託サービスとして300件以上)
  • ベクター構築から生産・精製までトータルにサポート(各ステップのみの受託も承ります)
  • お客様が希望の試験系・スケールアップに対応

[過去の生産事例]
* 2008年4月~2023年3月受託生産分

  1. 発現成功率(ウェスタンブロッティングによる発現確認)

    Protein Type Projects 成功率(%)
    分泌型タンパク質 110/111 99.1
    膜タンパク質 90/91 98.9
    細胞内タンパク質 82/82 100
    核タンパク質 50/53 94.3
    ウイルス由来タンパク質 80/80 100
    その他局在不明 19/19 100
    Total success rate: 431/436 98.9
  2. 生産量と純度(fig.2

サービス内容

[BAC Xpress EZ(簡易発現コース)]
昆虫細胞およびバキュロウイルスを用いた組み換えタンパク質の簡易的な発現受託サービスです。
組み換えタンパク質を最短2週間でお手元にお届けいたします。「低コストで発現チェックを行いたい方」にオススメのサービスです。
また、簡易的な1L生産・精製コースもご用意しておりますので、精製タンパク質が必要な方にもご利用いただけます。

  • サービスの流れ

    1. 発現ベクターの作製(*)
      頂いたターゲット情報をもとに、発現ベクターを構築します。(お客様ご自身でベクター構築も可能です。)
    2. コトランスフェクション
      発現ベクターとAcNPV genome DNAをsf9細胞に今トランスフェクションし、簡易的に組み換えウイスル液を作製します。
      (一般的に行われるウイルスの純化・倍幅・タイター測定を省略しております)
    3. 生産・発現確認
      100mLのexpresSF+® 細胞にウイルス液を添加後、組み換えタンパク質を発現させ、ウェスタンブロッティングにより発現を確認します。
      簡易発現で精製を希望される方に1 Lの生産プランをご用意しております。
      (100 mLで精製すると十分な量・質のタンパク質が得られないリスクがあるため)
    4. 試料・試験報告書 納品
      発現物と報告書を送付いたします。
  • 発現例(fig.3
    His-tag付きタンパク質の発現(ウェスタンブロッティング)
[BAC Xpress(通常コース)]
Bac Xpress EZでウイルス液作製後、ウイルスの純化から発現条件検討、大量生産まで提供する網羅的サービスです。
ステップごとに対応可能で、お客様のご希望に合わせた試験系を構築しいたします。

  • サービスの流れ(ウイルス液作製後)

    1. ウイルスの純化
      作製したウイルス液をプラークアッセイにより純化。純化したウイルスを増幅させ、生産用ウイルス液を作製する。
    2. タイター測定
      作製したウイルス液のタイター(力価)を測定する。
    3. 発現条件検討
      生産用ウイルス液を用いて、MOI:2 or 3 点、時間:3 点で条件検討を行い、最適な感染条件を決定する。
    4. 生産・発現確認
      お客様ご指定のスケールのexpresSF+® 細胞培養液に生産用ウイルス液を添加し、組み換えタンパク質の生産を行う。
      その後、発現物をウェスタンブロッティングで確認する。
    5. アフィニティー精製
      お客様ご指定のプロトコルで精製を実施。
    6. 試料・試験報告書 納品
      精製物(生産のみの場合、培養上清または細胞ペレット)、各ステップで作製したウイルス液、報告書を送付いたします。

納品物

[BAC Xpress EZ(簡易発現コース)]
  • 培養上清、細胞ペレット
  • ウイルス液(コトランスフェクション液)
  • 発現ベクター
  • 試験報告書

[BAC Xpress(通常コース)]
  • 精製物(生産のみの場合、細胞ペレットまたは培養上清)
  • ウイルス液
  • 試験報告書

* 本サービスの納品物は「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律(通称:カルタヘナ法)」使用規制対象となりますので、ご使用に際しては規制に則し、適切にお取り扱いください。

ご注文に関して

以下のファイルをご利用の上、お問い合わせフォーム からご送付ください。

参考価格・納期

  • BAC Xpress EZ(簡易発現コース)

    サービス項目価格(税抜)納期
    BAC Xpress EZ¥195,0002週間

    [1 L精製お試しコース]
    Bac Xpress EZ(1 L生産)にアフィニティー精製を加えたコースになります。
    ウイルス液を作製し、1Lで簡易発現、アフィニティー精製(Ni精製)を行います。
    昆虫細胞・バキュロウイルス発現系で生産精製を試されたい方にご利用いただけます。
    *発現物が見られなかった場合、試験を中断し、実施した分の試験費用を請求いたします。

    サービス項目価格(税抜)納期
    1 L精製お試しコース¥645,000約1ヶ月
    [オプション 発現ベクター]

    サービス項目価格(税抜)納期
    発現ベクターの作製(*)45~ / bp +¥22,500~3週間

    * お客様ご提供の遺伝子を使用する場合(載せ替え)、¥200,000(税抜)となります。

  • BAC Xpress(通常コース)

    項目No.サービス項目価格(税抜)納期
    1ウイルスの純化¥200,0002週間
    2組み換えウイルス液の増幅¥200,0002週間
    3タイター測定¥150,0002週間
    4感染用ウイルス液の作製¥100,0001週間
    5発現条件検討試験(6区)¥350,0002週間
    発現条件検討試験(9区)¥500,0002週間
    6生産(1L)¥150,0001週間
    生産(2L)¥300,0002週間
    生産(5L)¥600,0002週間
    生産(10L)¥1,000,0003週間
    7発現確認¥100,0001週間
    8アフィニティー精製¥400,000~2週間

関連サイト