特長

• 血清型1、2、5、6から目的にあったAAVベクターを選択可能
• タカラバイオ独自のAAVベクター抽出法により高純度ウイルスベクター液を作製
• 10¹² vg（vector genomes）以上の高力価ウイルスをご提供

概要

アデノ随伴ウイルスベクター作製キットAAVpro Helper Free System（製品コード 6230：AAV2 など） を用いて、目的遺伝子を搭載した血清型1、2、5、6のアデノ随伴ウイルスベクターを、ヘルパーウイルスを使用せずに安全に作製いたします。
AAV2ベクターの作製には力価向上効果のあるmiRNAの発現カセットを含むpRC2-mi342プラスミドDNAを使用しています。また、タカラバイオ独自のウイルスベクター抽出法により、高力価、高純度のアデノ随伴ウイルスベクターを作製いたします。

CRE Recombinase発現AAVベクター、LacZ発現AAVベクターについても専用のアデノ随伴ウイルスベクター作製キットAAVpro Helper Free System（AAV2-CRE Recombinase）（製品コード 6652）、AAVpro Helper Free System（AAV2-LacZ）（製品コード 6655）などを用いて作製いたします。

アデノ随伴ウイルスベクターを用いた遺伝子導入法は、以下の利点を持ち、多くの遺伝子導入実験に利用されています。（fig.1）

1. 拡散防止措置P1の施設でも取扱いが可能
2. 増殖 / 非増殖のいずれの細胞にも遺伝子導入が可能
3. 免疫原性が低く、動物個体への遺伝子導入に最適
4. 非分裂細胞にて長期間の発現が可能

サービス内容

ステップ毎にご注文いただけます。

A.アデノ随伴ウイルス（AAV1、2、5、6）ベクターの作製
・pAAV-GOIプラスミドDNA、pRCプラスミドDNAおよびpHelperプラスミドDNAをHEK293細胞またはHEK293T細胞へトランスフェクション
・タカラバイオ独自の抽出法により、凍結融解法や超音波破砕法と比較して高純度かつ高効率にAAVベクターを抽出
・培養細胞への感染実験（in vitro実験）を行うために十分な10¹²vg以上のウイルスベクター液を調製
・AAVpro Titration Kit（for Real Time PCR）Ver.2（製品コード 6233）を使用し、アデノ随伴ウイルスベクターゲノムの両末端に存在するITR（Inverted Terminal Repeat）をターゲット配列としてAAVゲノムを定量
＊ タカラバイオ取扱ベクター以外を使用する場合は、別途お問い合わせください。

B.アデノ随伴ウイルス（AAV1、2、5、6）ベクターの精製
・AAVpro Purification Kit (All Serotypes)（製品コード 6666）、AAVpro Purification Kit（AAV2）（製品コード 6232）アフィニティ―クロマト、超遠心法を組み合わせたウイルスベクター液の精製
・動物個体への投与実験（in vivo実験）を行うのに十分な10¹² vg/mLのウイルスベクター液の調整
　※TCID50（50％ Tissue Culture Infections Dose）法による感染力価の測定も可能ですので、ご相談ください。

【オプションサービス】
プラスミドDNA調製
・目的遺伝子を挿入した発現プラスミドDNA（pAAV-GOI vector）を作製（＊1）
・挿入遺伝子のサイズ（＊2）、挿入接続部位の塩基配列を確認
＊1各セロタイプのAAVpro Helper Free System（製品コード 6673、6230、6650、6651）に含まれるpAAV-CMV Vectorを使用
＊2 挿入可能な遺伝子長は2.5kbまで
・ウイルスベクター調製用プラスミドDNAの大量調製

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納品物

• アデノ随伴ウイルスベクター液　　　10¹² vg～
  ＊ 血清型、搭載遺伝子、製造スケールで変動
• 精製アデノ随伴ウイルスベクター作製の場合　　　10¹¹ vg
  ＊ 血清型、搭載遺伝子、製造スケールで変動
• 作業報告書

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受入サンプル

• プラスミドDNAの構築からの場合　　　　　　　　　　プラスミドDNA　　　　　3μg以上
• アデノ随伴ウイルスベクターの作製からの場合　　　　各種プラスミドDNA　　　2mg以上

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ライセンス情報

詳細はタカラバイオ社HPにてご確認ください。