ID: J00153
ID: J00153
タカラバイオ / タカラバイオ
アデノ随伴ウイルス(AAV)ベクター作製
P1レベルで高効率に遺伝子導入できるウイルスベクター
カテゴリ
遺伝子工学 > 組換ベクター・ウイルス作製 > 各種組換えウイルスベクター作製
遺伝子工学 > 組換ベクター・ウイルス作製 > アデノ随伴ウイルス(AAV)ベクター作製・アデノウイルスベクター作製
サービスについて
特長
- 血清型1、2、5、6から目的にあったAAVベクターを選択可能
- タカラバイオ独自のAAVベクター抽出法により高純度ウイルスベクター液を作製
- 1012 vg(vector genomes)以上の高力価ウイルスをご提供
概要
アデノ随伴ウイルスベクター作製キットAAVpro Helper Free System(製品コード 6230:AAV2 など) を用いて、目的遺伝子を搭載した血清型1、2、5、6のアデノ随伴ウイルスベクターを、ヘルパーウイルスを使用せずに安全に作製いたします。AAV2ベクターの作製には力価向上効果のあるmiRNAの発現カセットを含むpRC2-mi342プラスミドDNAを使用しています。また、タカラバイオ独自のウイルスベクター抽出法により、高力価、高純度のアデノ随伴ウイルスベクターを作製いたします。
CRE Recombinase発現AAVベクター、LacZ発現AAVベクターについても専用のアデノ随伴ウイルスベクター作製キットAAVpro Helper Free System(AAV2-CRE Recombinase)(製品コード 6652)、AAVpro Helper Free System(AAV2-LacZ)(製品コード 6655)などを用いて作製いたします。
アデノ随伴ウイルスベクターを用いた遺伝子導入法は、以下の利点を持ち、多くの遺伝子導入実験に利用されています。(fig.1)
- 拡散防止措置P1の施設でも取扱いが可能
- 増殖 / 非増殖のいずれの細胞にも遺伝子導入が可能
- 免疫原性が低く、動物個体への遺伝子導入に最適
- 非分裂細胞にて長期間の発現が可能
サービス内容
ステップ毎にご注文いただけます。A.アデノ随伴ウイルス(AAV1、2、5、6)ベクターの作製
・pAAV-GOIプラスミドDNA、pRCプラスミドDNAおよびpHelperプラスミドDNAをHEK293細胞またはHEK293T細胞へトランスフェクション
・タカラバイオ独自の抽出法により、凍結融解法や超音波破砕法と比較して高純度かつ高効率にAAVベクターを抽出
・培養細胞への感染実験(in vitro実験)を行うために十分な1012vg以上のウイルスベクター液を調製
・AAVpro Titration Kit(for Real Time PCR)Ver.2(製品コード 6233)を使用し、アデノ随伴ウイルスベクターゲノムの両末端に存在するITR(Inverted Terminal Repeat)をターゲット配列としてAAVゲノムを定量
* タカラバイオ取扱ベクター以外を使用する場合は、別途お問い合わせください。
B.アデノ随伴ウイルス(AAV1、2、5、6)ベクターの精製
・AAVpro Purification Kit (All Serotypes)(製品コード 6666)、AAVpro Purification Kit(AAV2)(製品コード 6232)アフィニティ―クロマト、超遠心法を組み合わせたウイルスベクター液の精製
・動物個体への投与実験(in vivo実験)を行うのに十分な1012 vg/mLのウイルスベクター液の調整
※TCID50(50% Tissue Culture Infections Dose)法による感染力価の測定も可能ですので、ご相談ください。
【オプションサービス】
プラスミドDNA調製
・目的遺伝子を挿入した発現プラスミドDNA(pAAV-GOI vector)を作製(*1)
・挿入遺伝子のサイズ(*2)、挿入接続部位の塩基配列を確認
*1各セロタイプのAAVpro Helper Free System(製品コード 6673、6230、6650、6651)に含まれるpAAV-CMV Vectorを使用
*2 挿入可能な遺伝子長は2.5kbまで
・ウイルスベクター調製用プラスミドDNAの大量調製
納品物
- アデノ随伴ウイルスベクター液 1012 vg~
* 血清型、搭載遺伝子、製造スケールで変動 - 精製アデノ随伴ウイルスベクター作製の場合 1011 vg
* 血清型、搭載遺伝子、製造スケールで変動 - 作業報告書
受入サンプル
- プラスミドDNAの構築からの場合 プラスミドDNA 3μg以上
- アデノ随伴ウイルスベクターの作製からの場合 各種プラスミドDNA 2mg以上
ライセンス情報
詳細はタカラバイオ社HPにてご確認ください。ご注文に関して
お問い合わせフォーム よりお問い合わせください。
参考価格・納期
サービス項目 | 価格(税抜) | 納期 |
---|---|---|
1. アデノ随伴ウイルスベクターの作製 | ¥950,000~ | 6週間 |
2-1.アデノ随伴ウイルスベクターの精製 (細胞ペレットからAAVを回収) |
¥550,000~ | 6週間 |
2-2.アデノ随伴ウイルスベクターの精製 (細胞ペレットおよび培養上清からAAVを回収) |
¥1,400,000~ | 6週間 |
2-3.アデノ随伴ウイルスベクターの精製(超遠心) |
お問い合わせ |
お問い合わせ |
(オプション) プラスミドDNAの作製 |
¥170,000~/件 * 遺伝子長で変動 |
4~7週間 |
関連サイト
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