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遺伝子改変細胞株の作製 ID: J01255

iPS細胞や癌細胞の目的遺伝子をノックアウトまたは目的遺伝子をノックインした細胞株の作製を行います。

サービスについて

概要

iPS細胞や癌細胞の目的遺伝子をノックアウトまたは特定変異をノックインした細胞株の作製を行います。DNAベクター導入技術を用いることにより、高効率に遺伝子改変細胞株の樹立が可能です。目的遺伝子を導入するノックイン等をご希望の場合は、相同組換え用ベクター構築も承ります。
* 御供与物として市販ベクターが必要となります。

サービス内容

詳細なサービス内容は、『参考価格・納期』をご確認ください。

  • ノックアウト細胞株作製
  • ノックイン細胞株作製
  • トライアル培養
  • バルク細胞クローニング

作製実績

一般的に良く使用される293 (HEK293)細胞をはじめ、様々な細胞株におけるDNAベクター導入を実施して参りました。現在までにユニーテック社にてDNAベクター導入に成功した主な細胞株を以下の表に記載しております。記載のない細胞株であっても、ぜひご相談くださいませ。
由来組織 由来種 細胞株名
ヒト DMS 273、NCI-H1048、SBC-5
肝臓 ヒト HuH-7
腎臓 ヒト 293(HEK293)
ヒト HCT 116
筋肉 マウス HL-1
マウス MC3T3-E1
リンパ球 ヒト TK6
多能性幹細胞 ヒト iPS

ご注文に関して

お問い合わせフォーム よりお問い合わせください。

参考価格・納期

ノックアウト細胞株作製
品名 種別 単位 価格(税抜)
試験計画書作成 試験計画構築・書類作成等 ¥30,000
細胞培養 細胞培養基本料金 ¥150,000
標的遺伝子配列確認 標的配列周辺領域 (約2 kbp, primerの設計及び合成含む)
ダイレクトシークエンス法
¥120,000
RNA設計及び合成 in vitro 切断チェック含む ¥550,000
標的遺伝子座のコピー数算定 リアルタイムPCR解析 (2point) ¥200,000
標的遺伝子の発現解析 標的遺伝子の半定量PCR ¥180,000
トランスフェクション 標的細胞にベクターを導入
(リポフェクション法またはエレクトロポレーション)
¥150,000
1次スクリーニング KO Alleleの検出 (1 point、PCR条件検討あり) [PCR法] ¥200,000
クローン化 限界希釈によるクローニング ¥300,000
2次スクリーニング
(Genotyping)
KO Alleleの検出 (1 point、PCR条件検討なし)[PCR法] ¥200,000
KO Alleleの配列確認 [クローニングシークエンス法] ¥300,000
拡大培養・凍結保存 納品用クローンの拡大培養・凍結保存 ¥100,000
マイコプラズマ検査 PCR法による納品用クローンのマイコプラズマ検査 ¥50,000
最終報告書作成 試験結果のまとめ ¥30,000
納品 ドライアイス代、輸送費、雑費含む ¥20,000
合計 ¥2,580,000~

ノックイン細胞株作製
点変異の挿入も承っております。
サービス項目 価格(税抜) 納期
ノックイン細胞株作製 お問い合わせ お問い合わせ

トライアル培養
ユニーテック社のDNAベクター導入受託サービスは多種多様な細胞株を対象として実施して参りました。その過程において、標的細胞株の性質により標準的な工程では作製が難しいケースにも遭遇しております。その場合は対象工程を標的細胞株の性質に合わせて変更することで対応可能となる場合が多くあるものの、対応内容によっては作製スケジュールに大きな影響を及ぼすことがあります。そのため、ユニーテックでは試験開始前に標的細胞株の各工程への適性確認として、トライアル培養の実施を推奨しております。
なお、成功実績リストに掲載されている細胞株については、トライアル培養は不要です。
品名 種別 単位 価格(税抜)
トライアル培養 DNAベクター導入における各工程への適性確認 ¥180,000/株

バルク細胞クローニング
DNAベクター導入において、最も障害となり得る工程の一つにクローニング(シングルクローン化)が挙げられます。
DNAベクター導入ではDNA二重鎖の切断を引き起こすことで、非相同末端結合(non-homologous end joining)や相同組換(homologous recombination)等の修復機構を誘導し、インデル変異やドナーDNAのノックイン等の導入効率を大幅に引き上げています。しかしながら、特にインデル変異については様々なパターンで導入されるため、DNAベクター導入後の細胞集団のゲノムは均一ではないことが多くなります。従って、均一な集団を得るためには、クローニング工程を欠くことができません。
品名 種別 単位 価格(税抜)
細胞培養 細胞培養基本料金 ¥100,000~/種
クローニング 限界希釈法その他(最大40クローン) ¥250,000~/種
拡大培養・凍結保存 クローンの小スケール凍結保存(最大40クローン) ¥150,000/種
試験報告書作成 中間報告書、最終報告書作成等 試験 ¥25,000/試験
納品 ドライアイス代、輸送費、雑費含む ¥40,000/回
合計 ¥565,000~

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