概要
次世代シーケンサーから出力された配列データを解析いたします。コンサルティングにて研究目的をお伺いし、 お客様の幅広いご要望にお応えします。
特長
幅広い解析バリエーション
次世代シーケンサーは従来シーケンサーの配列決定能を大きく超え、得られる膨大なデータからは、遺伝的多型や挿入 / 欠失、 転写産物の発現量など多岐にわたる解析が可能になりました。
MOGERA
® -シーケンサーでは、コンサルティングを通してお客様の解析ご要望をお伺いしながら、次世代シーケンサーから出力される大量配列データの解析を行います。解析担当者が配列データの2次解析(リシーケンス解析・コンティグ作成)および各種3次解析を実施いたしますので、解析目的をご相談ください。
また、実験サンプルの調整やシーケンスの実施、ベースコールまでの1次解析に関するご要望にも対応しております。
2次解析
- リシーケンス解析(fig.1)
既に配列が決定されているゲノムDNAまたは転写産物(トランスクリプト)の配列を参照配列として、次世代シーケンサーからベースコールされた各配列データのマッピングを実施します。既知の配列に対して再度塩基配列を解読することから、リシーケンス解析と呼ばれます。
- コンティグの作成(fig.2)
次世代シーケンサーから得られた短い塩基配列データ同士をマッピングすることにより、塩基配列が解読出来た領域では配列データが少しずつ重なりながら集合します。この塩基配列の連なりをコンティグと呼び、ベースコールされた配列データのコンティグを作成することで、まだ配列が決定されていない生物種のゲノムDNAについても配列解読を行うことが可能となります。
3次解析
- シーケンス配列に対するアノテーション付与
2次解析から得られたシーケンス配列について公共遺伝子データベースを参照し、ゲノムの位置情報や転写産物情報などから該当するアノテーションを付与します。
- 多型情報(SNP:Single Nucleotide Polymorphism)解析
ある生物種が保有するゲノム配列について、個体間における塩基配列の差異を遺伝子多型と呼びます。一般的に、その塩基差異を持つ個体が全体の1%以上の場合を遺伝子多型、1%未満の場合を変異として区別します。また、遺伝子多型の中でもゲノム配列中の一塩基について確認される配列差を、SNP(一塩基多型)と呼びます。
参照配列に対して各個体から得られた塩基配列を比較することで、遺伝子多型の研究が可能です。疾患への感受性や薬剤への耐性、表現型に現れる個体差等についての知見を得ることが期待できます。
- 挿入 / 欠損解析(fig.3)
次世代シーケンサーから得られた塩基配列を既知のゲノムDNA(参照配列)に対しマッピングすることで、シーケンス対象とした生物個体における遺伝子領域の 置換や挿入、欠損について網羅的に解析することができます。
従来シーケンサーやマイクロアレイの解析と比べ、次世代シーケンサーでは時間・精度共に優れた変異解析を行うことが期待できます。
- クロマチン免疫沈降シーケンシング(ChIP-Seq)
ChIP-Seq(Chromatin immunoprecipitation-sequencing)とは、免疫沈降法を応用し、タンパク質と結合するDNA配列を解読することで、ゲノム上での転写因子などタンパク質結合領域の分布を明らかにする手法です。
次世代シーケンサーによるChIP-Seqでは、これまでのマイクロアレイ技術によるChIP-chipと比較し、プローブデザインやプローブ数のバイアスがなく、 ゲノムワイドな網羅的かつ高感度な解析が可能になります。
- メチレーション解析
メチル化修飾を受けた遺伝子プロモーター領域のシトシン塩基が、遺伝子発現調節に関与していることが示唆されています。
これまでゲノムの配列情報のみでは分からなかった、ガンなどの疾病原因遺伝子に対する調節機構の解明につながるとして、積極的な解析が行われています。
- 遺伝子発現(Digital gene expression)解析
マイクロアレイでは、チップ作成時にデザインされた数十塩基のプローブ配列に対し、転写産物をハイブリダイゼーションすることで各遺伝子の発現量を測定します。
一方、次世代シーケンサーでは転写産物の配列を直接読み取りマッピングすることで、アレイ同様の発現解析を行うことが可能です。
- Exome解析
Exomeはゲノム上のExonを網羅的に解析する手法です。
Exonは、ゲノム上のタンパク質に翻訳される部分で、ゲノム比で1%程度しか存在しません。生物の有する全ゲノム領域を解析するのではなく、Exonのみをシーケンスすることで、形質に関与する多様性(多型)の同定を効率的に行うことが可能です。
サービスの流れ
- 解析要望の確認~お見積り
まずはご希望の解析内容についてご連絡ください。担当者が詳細をお伺いし、お見積と仕様を提示させていただきます。
- お申込み
担当者までお申し込み下さい。
- データの送付
解析を希望される次世代シーケンスデータのコピーを、CD-ROMまたはDVD-ROMにてご送付ください。解析内容によって、参照配列や位置情報などのファイルをご提供いただく場合がございます。
- コンサルティング・データ解析
シーケンスデータの到着後、解析担当者よりお電話にてご連絡させていただきます。コンサルティングを通して解析方針を決定し、お客様の研究目的に沿った解析を実施いたします。
- 納品
解析報告書をCD-ROM又はDVD-ROMに格納し、お手元にお届けいたします。